釉原蛋白是细胞外釉基质的主要蛋白种类，依据不同的种属从Mr 20 000～27 000，富含疏水性的脯氨酸。其基因结构、染色体定位和一级结构基本清楚，不同种属的釉原蛋白氨基酸序列高度同源［2］。釉原蛋白的转录与成釉细胞最初的极化有关。一旦基因开始表达，釉原蛋白随之转录［3］。内釉上皮细胞的分化是由外胚间充质细胞相互作用诱导的，以后内釉上皮细胞开始分化为成釉细胞并表达釉原蛋白。在釉基质成熟阶段，成釉细胞降低釉原蛋白的含量。虽然关于釉原蛋白确切的功能目前还不清楚，但它在釉质生物矿化的过程中起着决定性的作用，它参与Ca的转运，控制釉质晶体的生长和大小［2］。

　　关于釉原蛋白的异质性，有两个机理：一是在釉质发育阶段细胞外蛋白酶对新生釉原蛋白分子的降解，产生了一系列小的蛋白片段［4］；二是釉原蛋白转录时的交叉剪切［5］，这种交叉剪切发生在多种种属中，如牛、人、猪、小鼠、大鼠。有一些这样交叉剪切的mRNA　可以在蛋白水平上检测到［6］。我们用于原位杂交的探针是从大鼠cDNA质粒中转录的，包括所有七个交叉剪切位点的大部分编码序列。釉原蛋白交叉剪切的mRNA 已经在钟状期、分泌期、成熟期的成釉细胞中检测到［7］，因此在大鼠釉质发育的不同时期检测的杂交信号可以代表不同的交叉剪切产生的mRNA.本实验检测了釉原蛋白在Wistar 大鼠牙胚发育各期的转录，显示大鼠下颌第一磨牙最早可以检测到Am mRNA是在出生后第1 d（钟状期、前成釉细胞正在极化的时期）。出生后前四 天成釉细胞Am mRNA 水平逐渐升高，到第5 d达到最高，以后随着成釉细胞分化完成，成熟期成釉细胞中的表达持续在一个较低的水平。成牙本质细胞中未检测到表达。因此可以说Am mRNA 在分泌性成釉细胞中高表达，在分泌后期细胞中的表达逐渐下降，分泌完成以后不表达。釉原蛋白量在整个分泌阶段逐渐升高，成熟阶段的早期达到高峰，然后快速下降。成熟釉质的细胞外基质中釉原蛋白分解消失。

　　细胞分泌和表达的基础是细胞核内基因组有选择的逐渐关闭或开放，导致某些成分的表达被抑制，而某些特异性蛋白表达开始并逐步增强［8］。但细胞核内基因组有选择性表达并导致成釉细胞分泌、分化的调控因子有哪些，他们分别调控哪些基因的关闭和哪些基因的开放，迄今为止仍不清楚。

　　作者单位：西安第四军医大学口腔医学院 710032

　　参考文献

　　1.Karg HA， Burger EH， Lyaruu DM， et al. Gene expression and immunolocalization of amelogenins in developing embryonic and neonatal hamster teeth. Cell Tissue Res， 1997，288：545

　　2.Deutsch D， Catalano-Sherman J， Dafni L， et al.Enamel matrix proteins and ameloblast biology. Connect Tissue Res. 1995，32：97

　　3.Krishnan H， Trawich S，Witz H. The chemistry and biology of mineralized tissue.Biochemistry，1996，25：4879

　　4.Robinson C，Kirkham J，Brookes SJ， et al. The chemistry of enamel development. Int J Dev Biol， 1995，31：145

　　5.Simmer JP. Alternative splicing of amelogenins.Connect Tissue Res， 1997，32：134

　　6.Robinson C ， Brookes SJ， Shore RC， et al. The developing enamel matrix：Nature and function. Eur J Oral Sci， 1998，106：282

　　7.Girodot M， Sire JY. Evolution of the amelogenin gene in toothed and toothless vertebrates.Dev Biol，1998，106：501

　　8.Paine ML， Krebsbach PH， Chen LS. Protein-to-protein interactions： Criteria defining the assembly of the enamel organic matrix. J Dent Res， 1998，77：496